Wy dielde ferline wike ferskate oerwagings foar it brûken fan cellulose acetate membraan elektroforese, en wy sille ôfmeitsje dit ûnderwerp hjir hjoed foar jo referinsje.
Seleksje fan Buffer konsintraasje
De bufferkonsintraasje brûkt yn cellulose acetate membraan elektroforese is oer it generaal leger as dy brûkt yn papier electrophoresis.De meast brûkte pH 8.6Barbital buffer wurdt typysk keazen binnen it berik fan 0,05 mol / L oant 0,09 mol / L.By it selektearjen fan de konsintraasje wurdt in foarriedige fêststelling makke.Bygelyks, as de lingte fan it membraan strip tusken de elektroden yn de elektroforese keamer is 8-10cm, in spanning fan 25V is nedich per sintimeter fan membraan lingte, en de hjoeddeiske yntinsiteit moat wêze 0,4-0,5 mA per sintimeter fan membraan breedte.As dizze wearden net wurde berikt of oerhelle tidens elektrophoresis, moat de bufferkonsintraasje ferhege of verdund wurde.
In te leech buffer konsintraasje sil resultearje yn in flugge beweging fan de bands en in tanimming fan band breedte.Oan 'e oare kant sil in te hege bufferkonsintraasje de bandmigraasje fertrage, wêrtroch it dreech is om bepaalde skiedingsbanden te ûnderskieden.
Dêrby moat opmurken wurde dat yn cellulose acetate membraan electrophoresis in wichtich part fan de hjoeddeiske wurdt útfierd troch de stekproef, dat genereart in flinke hoemannichte waarmte.Soms kin de keazen bufferkonsintraasje passend wurde beskôge.Under betingsten fan ferhege omjouwingstemperatuer of by it brûken fan hegere spanning kin de ferdamping fan wetter troch de waarmte lykwols yntinsiver wurde, wat resulteart yn in te hege bufferkonsintraasje en sels feroarsaket dat it membraan útdroeget.
Sample Volume
Yn cellulose acetate membraan elektroforese, it bedrach fan sample folume wurdt bepaald troch ferskate faktoaren, ynklusyf elektrophoresis betingsten, eigenskippen fan it stekproef sels, kleuring metoaden, en detectie techniken.As algemien prinsipe, hoe gefoeliger de deteksjemetoade, hoe lytser it samplevolume kin wêze, wat foardielich is foar skieding.As de sample folume is oermjittich, de electrophoretic skieding patroanen meie net dúdlik, en staining kin ek wêze tiidslinend.By it kwantitatyf analysearjen fan 'e skieden bevlekte banden mei elueringskolorimetryske deteksjemetoaden, soe it samplevolumint net te lyts wêze moatte, om't it kin resultearje yn legere absorbânsjewearden foar bepaalde komponinten, wat liedt ta hegere flaters by it berekkenjen fan har ynhâld.Yn sokke gefallen moat it samplevolume passend ferhege wurde.
Typysk farieart it samplevolumint tafoege op elke sintimeter fan 'e sample-applikaasjeline fan 0,1 oant 5 μL, lykweardich oan in stekproefbedrach fan 5 oant 1000 μg.Bygelyks, yn routine serumproteinelektroforese-analyse, is it samplevolumint tafoege oan elke sintimeter fan 'e tapassingsline oer it algemien net mear as 1 μL, lykweardich oan 60 oant 80 μg proteïne.By it analysearjen fan lipoproteins as glycoproteins mei deselde elektroforesemetoade moat it samplevolume lykwols navenant ferhege wurde.
Ta beslút, it meast geskikte sample folume moat wurde selektearre basearre op spesifike betingsten troch in rige fan foarriedige eksperiminten.
Seleksje fan Staining Solution
De skieden bands yn cellulose acetate membraan elektroforese wurde typysk kleurd foar detectie.Ferskillende sample komponinten fereaskje ferskillende kleuring metoaden, en de kleuring metoaden geskikt foar cellulose acetate membraan elektroforese meie net hielendal fan tapassing op filter papier.
D'r binne trije wichtige prinsipes om te kiezen foar kleuroplossingcellulose acetate membraan.Earst,Wetteroplosbere kleurstoffen moatte de foarkar krije oer alkoholoplosbere kleurstoffen om membraankrimp en ferfoarming te foarkommen troch de kleuroplossing fan de lêste.Nei it kleurjen is it wichtich om de membraan mei wetter te spieljen en de kleuringsdoer te minimalisearjen.Oars kin it membraan krollen of krimp wurde, wat de folgjende deteksje soe beynfloedzje.
Twads is it de foarkar om kleurstoffen te selektearjen mei sterke kleuringsaffiniteit foar it stekproef.Yn cellulose acetate membraan elektroforese fan serum aaiwiten, amino swart 10B wurdt faak brûkt fanwege syn sterke kleuring affiniteit foar ferskate serum aaiwyt komponinten en syn stabiliteit.
Tredde, betroubere kwaliteit kleurstoffen moatte wurde keazen.Guon kleurstoffen, nettsjinsteande it hawwen fan deselde namme, kinne befetsje ûnreinheden dy't resultearje yn in bysûnder tsjustere eftergrûn nei staining.Dit kin sels de oarspronklik goed skieden bands waerje, wêrtroch't se dreech te ûnderskieden binne.
As lêste is de kar fan konsintraasje fan kleuroplossing wichtich.Teoretysk kin it lykje dat in hegere kleuring oplossing konsintraasje soe liede ta mear yngeande kleuring fan sample komponinten en bettere kleuring resultaten.Dit is lykwols net it gefal.De binende affiniteit tusken de samplekomponinten en de kleurstof hat in bepaalde limyt, dy't net ferheget mei de tanimming fan konsintraasje fan kleuroplossing.Krektoarsom, in te hege konsintraasje fan kleuringsoplossing fergriemt net allinich de kleurstof, mar makket it ek lestich om in dúdlike eftergrûn te berikken.Boppedat, doe't de kleur yntinsiteit berikt in bepaalde maksimum wearde, de kleurstof syn absorbance kromme net folgje in lineêre relaasje, benammen yn kwantitative mjittings.In cellulose acetate membraan electrophoresis, de kleuring oplossing konsintraasje is oer it generaal leger as dat brûkt wurdt yn papier electrophoresis.
Details te witten oer Beijing Liuyi Biotechnology's cellulose acetate membraanelektroforesetank en syn elektroforese-applikaasje, besykje hjir:
lEksperimint foar it skieden fan serumprotein troch Cellulose Acetate Membraan
lCellulose Acetate Membraan Electrophoresis
As jo in oankeapplan hawwe foar ús produkten, aarzel dan net om kontakt mei ús op te nimmen.Jo kinne ús berjocht stjoere op e-post[e-post beskerme]of[e-post beskerme], of skilje ús asjebleaft op +86 15810650221 of foegje Whatsapp +86 15810650221 ta, of Wechat: 15810650221.
Referinsje:Electrophoresis (Twadde edysje) troch Mr. Li
Post tiid: Jun-06-2023