Eksperimint foar it skieden fan serumprotein troch Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis

Prinsipe

Cellulose acetate film elektroforese is in elektroforese metoade mei help fan in cellulose acetate film as stipe.It ferskynsel wêryn opladen dieltsjes nei de tsjinoerstelde elektrodes bewege ûnder de aksje fan elektrysk fjild wurdt elektroforese neamd.Sûnt elk proteïne hat in spesifyk isoelektrysk punt, as in proteïne wurdt pleatst yn in oplossing mei in pH leger as syn isoelectric punt, it aaiwyt wurdt posityf opladen en bewege nei de negative elektrodes.Krektoarsom, it beweecht nei de positive poal.Om't de snelheid fan proteïnemolekulen dy't yn in elektrysk fjild bewege is relatearre oan har lading, de foarm en grutte fan 'e molekulen, kinne ferskate proteïnen skieden wurde troch elektroforese.Serum befettet in ferskaat oan aaiwiten, dy't allegear isoelektryske punten hawwe op pH7.5 of minder.As serum wurdt pleatst yn pH 8.6 buffer te fieren electrophoresis, alle serum aaiwiten binne negatyf opladen en sil bewege nei de positive kant yn it elektryske fjild.Sûnt ferskate serum aaiwiten hawwe ferskillende ladingen op deselde pH, de molekulêre dieltsjes binne oars yn grutte, en dus de migraasje snelheid is oars, en se wurde skieden troch electrophoresis.De isoelektryske punten en molekulêre gewichten fan serumproteinen wurde werjûn yn 'e tabel hjirûnder:

Protein

Isoelektryske punten (PI)

Molekuul gewicht

Albumin

4.88

69 000

α1-gloulin

5.00

200 000

α2-glouline

5.06

300 000

β-gloulin

5.12

9 000~150 000

γ-gloulin

6.85~7.50

156 000~ 300 000

1

It eksperimint is te skieden ferskillende aaiwiten yn bloed serum mei cellulose acetate membraan (abbr. CAM) as stipe media.CAM is in soarte fan foamed loosefilm mei goede unifoarm, en de dikte is 0.1mm-1.5mm, dat hat in bepaalde wetter absorption.

Materialen, ynstruminten en reagents foar CAM Electrophoresis

Samples:sûn minsklik bloed serum

Ynstrumint:Netzteil DYY-6C, elektroforese tank DYCP-38C, superieure sample laden WD-9404

1-4

De reagenzjes

1) cellulose acetate membraan 7X9cm

2) PH 8.6 barbitolbufferoplossing (ionyske sterkte 0.05-0.09, it is 0.06tid tiid.): nim 1,84g Diethyl barbituric acid, en nim dan 1.03g Diethyl natrium pentobarbital, foegje wat destillearre wetter ta om te ferwaarmjen om op te lossen, en meitsje oant 1000 ml;

3) Snits: Ponceau S 0,2g, Trichloroacetic 3g, add 100ml destillearre wetter;

4) TBS / T of PBS / T: 45ml 95% ethanol, 5ml glacial acetic acid, add 50ml destillearre wetter;

5) Cleaning Solution: 70ml anhydrous ethanol, 30ml ijsacetic acid.

Eksperimint Method

1) Bereid it membraan: Dompelje it membraan yn 'e barbitol-bufferoplossing 30min-8h, en nim it út, ferwiderje de ekstra oplossing troch absorberend papier.

2) Samples laden: ûnderskiede de rûge kant en glêde kant fan it membraan, en markearje in line op 1,5 sm ôfstân nei it boppeste ein oan 'e rûge kant.Laad samples troch superieure sample laden ark oan 'e rûge kant.Opmerking: De samples moatte wurde laden op 'e rûge kant fan it membraan.Nei't de serummonsters folslein yn 'e membraan binne penetrearre, draaie it membraan oer, set de rûge kant (mei samples) nei ûnderen nei de tank, en it ein mei samples wurdt yn negative elektrodes pleatst.

3) Electrophoresis: Skeakelje de macht oanbod, 0,40.6m A/cm membraan, de rinnende tiid is 30-45 min.Nei it útfieren fan elektroforese, útsette de macht.

4) Stain en skjin: Nim it membraan út 'e tank, en dompeljeit yn 'e kleurstof oplossing foar 5 min, en dan skjin it yn' e skjinmeitsjen oplossing oer en oer foar 3-4 kear oant de eftergrûn kleur is dúdlik.De serumproteinen moatte wurde toand op 'e bands, en normaal binne d'r fiif sônes, foarmje boppeste ein oan' e markearre line, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.

5) Behâld: set de droege elecrtophoresisbandyn skjinmeitsjen oplossing foar 10-15 minuten, en nim it dan út en plak it op in skjin glês, nei't it droech is, sil it in transparante film wurdeband.

EksperimintResultaat

1-3

It skiedingseffekt fan serummonsters is goed, en d'r is gjin ferskynsel fan band tailing.De werhelling fan 'e resultaten ferskilt fanwege de testprosedueres en de metoaden fan' e eksperimintator, en de repetabiliteit is heech.

Konklúzje

It rappe klinyske elektroforese-deteksjesysteem (Electrophoresis tankDYCP-38C,streamtafierDYY-6C en superieure sample laden WD-9404) produsearre troch úsDe bedriuw Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdfoldocht oan de eksperimintele easken,ende resultaten binne reproducible, ienfâldich en fluch, geskikt foarlesjaanûndersyk.

Beijing LiuyiBiotechnology Co., Ltd is spesjalisearre yn it produsearjen fan elektroforeseprodukten foar libbenswittenskippen, dy'that mear as 50-jierrige skiednis yn Sina en it bedriuw kin oer de hiele wrâld stabile en heechweardige produkten leverje.Troch jierren fan ûntwikkeling is it jo kar wurdich!

Wy binne no op syk nei partners, sawol OEM elektroforese tank as distributeurs wurde wolkom hjitten.

Foar mear ynformaasje oer ús, nim dan kontakt mei ús op fia e-post[e-post beskerme]of[e-post beskerme].


Post tiid: Nov-14-2022