Polyacrylamide gel elektroforese
Gelelektroforese is in fûnemintele technyk yn laboratoaren oer de biologyske dissiplines, wêrtroch de skieding fan makromolekulen lykas DNA, RNA en aaiwiten mooglik is.Ferskillende skiedingsmedia en meganismen kinne subsets fan dizze molekulen effektiver skieden wurde troch it brûken fan har fysike skaaimerken.Foar aaiwiten benammen, polyacrylamide gel elektroforese (PAGE) is faak de technyk fan kar.
PAGE is in technyk dy't makromolekulen skiedt, lykas aaiwiten, basearre op har elektroforetyske mobiliteit, dat is it fermogen fan analyten om nei in elektrode fan 'e tsjinoerstelde lading te bewegen.Yn PAGE wurdt dit bepaald troch de lading, grutte (molekulêre gewicht) en foarm fan it molekule.Analyten bewege troch poaren foarme yn polyacrylamide gel.Oars as DNA en RNA, ferskille aaiwiten yn lading neffens de opnommen aminosoeren, wat kin beynfloedzje hoe't se rinne.Aminosûrstringen kinne ek sekundêre struktueren foarmje dy't ynfloed hawwe op har skynbere grutte en dêrtroch hoe't se troch de poaren kinne ferpleatse.It kin dêrom soms winsklik wêze om aaiwiten foar elektroforese te denaturearjen om se te linearisearjen as in krektere skatting fan grutte fereaske is.
SDS PAGE
Natrium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel elektroforese is in technyk brûkt foar it skieden fan proteïne molekulen fan massa's 5 oant 250 kDa.De aaiwiten wurde skieden allinnich op basis fan harren molekulêre gewicht.Natriumdodecylsulfat, in anionyske surfaktant, wurdt tafoege yn 'e tarieding fan gels dy't de yntrinsike ladingen fan' e proteïnemonsters maskearret en har in ferlykbere lading ta massa-ferhâlding jout.Yn ienfâldige wurden, it denatureart de aaiwiten en jout har in negative lading.
Native PAGE
Native PAGE is in technyk dy't net-denaturearre gels brûkt foar de skieding fan aaiwiten.Oars as SDS PAGE, wurdt gjin denaturearjend middel tafoege yn 'e tarieding fan gels.As gefolch, de skieding fan aaiwiten fynt plak op basis fan lading en grutte fan aaiwiten.Yn dizze technyk binne de konformaasje, foldjen en aminosoerenketen fan 'e aaiwiten de faktoaren wêrfan de skieding ôfhinklik is.De aaiwiten wurde net skansearre yn dit proses, en kin weromfûn nei it foltôgjen fan skieding.
Hoe wurket polyacrylamide gel elektroforese (PAGE)?
It basisprinsipe fan PAGE is om analyten te skieden troch se troch de poaren fan in polyacrylamidegel te passearjen mei in elektryske stroom.Om dit te berikken wurdt in acrylamide-bisacrylamide-mix polymerisearre (polyacrylamide) troch de tafoeging fan ammoniumpersulfat (APS).De reaksje, dy't wurdt katalysearre troch tetramethylethylenediamine (TEMED), foarmet in net-lykas struktuer mei poaren dêr't analyten troch kinne bewege (figuer 2).Hoe heger it persintaazje totale acrylamide opnommen yn 'e gel, hoe lytser de poargrutte, dus hoe lytser de aaiwiten dy't troch kinne passe.De ferhâlding fan acrylamide oant bisacrylamide sil ek ynfloed hawwe op poriegrutte, mar dit wurdt faak konstant hâlden.Lytsere poargrutten ferminderje ek de snelheid wêrop lytse proteïnen troch de gel kinne ferpleatse, har resolúsje ferbetterje en foarkomme dat se rap yn 'e buffer rinne as stroom wurdt tapast.
Apparatuer foar Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Gelelektroforesesel (tank/keamer)
De gel tank foar polyacrylamide gel elektroforese (PAGE) is oars as de agarose gel tank.De agarose-geltank is horizontaal, wylst de PAGE-tank fertikaal is.Troch fertikale elektroforese sel (tank / keamer) wurdt in tinne gel (normaal 1.0mm of 1.5mm) getten tusken twa glêzen platen en monteard sadat de boaiem fan 'e gel wurdt ûnderdompele yn buffer yn ien keamer en de top wurdt ûnderdompele yn buffer yn in oare keamer.As stroom wurdt tapast, migreart in lyts bedrach fan buffer troch de gel fan 'e boppeste keamer nei de ûnderste keamer.Mei sterke klemmen om te garandearjen dat de gearstalling yn in oprjochte posysje bliuwt, fasilitearret de apparatuer snelle gelruns mei even koeling, wat resulteart yn ûnderskate bands.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd.De modellen DYCZ-20C en DYCZ-20G binne fertikale elektroforese-sellen (tanks / keamers) foar DNA-sekwinsjeanalyse.Guon fan 'e fertikale elektroforese sellen (tanks / keamers) binne kompatibel mei blotting systeem, lykas it model DYCZ-24DN, DYCZ-25D en DYCZ-25E binne kompatibel mei Western Blotting systeem model DYCZ-40D, DYCZ-40G en DYCZ-40F, dy't brûkt wurde foar it oerdragen fan it proteïnemolekule fan 'e gel nei it membraan.Nei SDS-PAGE elektroforese is Western Blotting in technyk om in spesifyk aaiwyt te detektearjen yn in aaiwyt mingsel.Jo kinne kieze dizze blotting systemen neffens de eksperimintele easken.
Electrophoresis Power Supply
Om de elektrisiteit te leverjen foar it útfieren fan 'e gel, sille jo in elektroforese-voeding nedich hawwe.By Liuyi Biotechnology leverje wy in oanbod fan elektroforese-krêftfoarsjenningen foar alle tapassingen.It model DYY-12 en DYY-12C mei hege stabile spanning en aktuele kin foldwaan oan hege spanning eask elektroforese.It hat de funksje fan stand, timing, VH en stap-foar-stap tapassing.Se binne ideaal foar IEF- en DNA-sequencing-elektroforese-applikaasje.Foar algemiene proteïne- en DNA-elektroforese-applikaasje hawwe wy it model DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, ensfh.Dizze kinne brûkt wurde foar de middelste en leechspanningselektroforeseapplikaasjes, lykas foar gebrûk yn skoallelab, sikehûslabor ensafuorthinne.Mear modellen foar stroomfoarsjenningen, besykje asjebleaft ús webside.
It merk Liuyi hat mear dan 50 jier skiednis yn Sina en it bedriuw kin oer de heule wrâld stabile en heechweardige produkten leverje.Troch jierrenlange ûntwikkeling is it jo kar wurdich!
Foar mear ynformaasje oer ús, nim dan kontakt mei ús op fia e-post[e-post beskerme] or [e-post beskerme].
Referinsjes foar Wat is polyacrylamidegelelektroforese?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel elektroforese, hoe't it wurket, technykfarianten, en syn tapassingen
Post tiid: mei-23-2022