Optimalisearjen fan gelelektroforese: bêste praktiken foar samplevolume, spanning en timing

Ynlieding

Gelelektroforese is in fûnemintele technyk yn molekulêre biology, in protte brûkt foar de skieding fan aaiwiten, nukleïnesoeren en oare makromolekulen. Goede kontrôle fan sample folume, spanning, en elektroforese tiid is krúsjaal foar it berikken fan krekte en reproducible resultaten.Us lab kollega biedtbêste praktiken foar it behearen fan dizze parameters tidens SDS-PAGE gelelektroforese.

3

Beijing Liuyi Biotechnology gel elektroforese produkten

Sample Volume: Garandearjen fan konsistinsje

By it útfieren fan SDS-PAGE-elektroforese is it samplevolume in wichtige faktor dy't de resolúsje fan jo resultaten signifikant kin beynfloedzje. It wurdt algemien oanrikkemandearre om 10 µL fan totaal proteïne per put te laden. Om konsistinsje te garandearjen en samplediffusie te foarkommen tusken neistlizzende putten, is it wichtich om in gelikense folume fan 1x laden buffer te laden yn alle lege putten. Dizze foarsoarch helpt om it fersprieden fan monsters yn oanbuorjende rydstroken te foarkommen, wat kin foarkomme as de put leech bliuwt.

Foardat jo samples laden, begjin altyd mei it tafoegjen fan in molekulêre gewichtsmarker oan ien put. Dit soarget foar maklike identifikaasje fan proteïnegrutte nei elektroforese.

1

Voltage Control: Balancing snelheid en resolúsje

De spanning tapast by elektrophoresis hat direkt ynfloed op sawol de snelheid wêrop samples migrearje troch de gel en de resolúsje fan 'e skieding. Foar SDS-PAGE is it oan te rieden om te begjinnen mei in lege spanning fan om de 80V. Dizze inisjele lege spanning lit de samples stadich en evenredich migrearje, en konsintrearje se yn in skerpe band as se de skiedende gel yngeane.

Sadree't de samples de skiedende gel folslein binne ynfierd, kin de spanning wurde ferhege nei 120V. Dizze hegere spanning fersnelt de migraasje, en soarget derfoar dat de aaiwiten effisjint wurde skieden neffens har molekulêre gewicht. It is essensjeel om de fuortgong fan 'e bromophenol blauwe kleurstoffront te kontrolearjen, wat oanjout op it foltôgjen fan' e elektroforese. Foar gels mei in konsintraasje fan 10-12% is 80-90 minuten typysk genôch; lykwols, foar 15% gels, Jo moatte miskien útwreidzje de rintiid bytsje.

Tiidbehear: witte wannear't te stopjen

Timing is in oare krityske faktor yn gelelektroforese. It útfieren fan de gel foar te lang of te koart in perioade kin liede ta suboptimale skieding. De migraasje fan 'e bromophenol blauwe kleurstof is in nuttige yndikator: as it de boaiem fan' e gel berikt, is it normaal tiid om de run te stopjen. Foar standert gels, lykas 10-12%, is in elektroforese-doer fan sawat 80-90 minuten typysk genôch. Foar hegere persintaazje gels, lykas 15%, moat de rintiid ferlingd wurde om folsleine skieding fan aaiwiten te garandearjen.

Bufferbehear: Buffers opnij brûke en tariede

Elektroforesebuffer kin 1-2 kear opnij brûkt wurde, ôfhinklik fan de spesifike betingsten fan jo laboratoarium. Foar optimale resultaten wurdt it lykwols oanrikkemandearre om frisse 10x buffer te meitsjen en it krekt foar gebrûk te ferwetterjen. Dit soarget derfoar dat de buffer syn effektiviteit behâldt, wat liedt ta betrouberere elektroforeseresultaten.

2

Beijing Liuyi Biotechnology gel elektroforese produkten

Troch it samplevolumint, spanning en elektroforesetiid soarchfâldich te kontrolearjen, kinne jo de krektens en reprodusearberens fan jo resultaten fan gelelektroforese signifikant ferbetterje. It ymplementearjen fan dizze bêste praktiken yn jo laboratoariumwurk sil jo helpe om dúdliker en mear ûnderskate bands te berikken, wat liedt ta bettere gegevens foar streamôfwerts analyse.

As jo ​​​​mear goede metoaden hawwe om gelelektroforese-eksperimint te optimalisearjen, wolkom om mei ús te besprekken!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) hat mear as 50 jier spesjalisearre yn it meitsjen fan elektroforese-ynstruminten mei ús eigen profesjonele technyske team en R&D-sintrum. Wy hawwe betroubere en folsleine produksjeline fan ûntwerp oant ynspeksje, en pakhús, lykas marketingstipe. Us haadprodukten binne Electrophoresis Cell (tank / keamer), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System ensfh.

As jo ​​​​in oankeapplan hawwe foar ús produkten, aarzel dan net om kontakt mei ús op te nimmen. Jo kinne ús berjocht stjoere op e-post[e-post beskerme]of[e-post beskerme], of skilje ús asjebleaft op +86 15810650221 of foegje Whatsapp +86 15810650221 ta, of Wechat: 15810650221.

Scan asjebleaft de QR-koade om ta te foegjen oan Whatsapp of WeChat.

2


Post tiid: Aug-20-2024