Gelelektroforese is ien fan 'e wichtichste metoaden brûkt yn molekulêre biology foar de analyze fan DNA. Dizze metoade omfettet de migraasje fan fragminten fan DNA troch in gel, wêr't se skieden wurde op basis fan grutte of foarm. Binne jo lykwols ea flaters tsjinkaam tidens jo elektroforese-eksperiminten, lykas útsmeerde bands op 'e agarosegel, of gjin bands op' e gel? Wat kin de oarsaak wêze fan dizze flaters?
Us technici hawwe hjir pearen fan probleemoplossing gearfette foar jo referinsje.
1. Smoarde bands op agarosegel
●It DNA wie degradearre. Foarkom nuklease fersmoarging.
● De elektroforesebuffer is net fris. Nei werhelle gebrûk fan elektrophoresisbuffer nimt de ionyske sterkte ôf, en syn pH-wearde nimt ta, sadat de bufferkapasiteit swakket, wat ynfloed hat op it elektroforese-effekt. It is oan te rieden om de elektroforesebuffer faak te ferfangen.
● Unjildich elektrophoresis-betingsten waarden brûkt. Lit de spanning net mear as 20 V / cm, en behâlde in temperatuer <30 ° C tidens elektroforese. Foar de gigantyske DNA-strânelektroforese moat de temperatuer <15 ° C wêze. Kontrolearje dat de elektroforesebuffer genôch bufferkapasiteit hat.
● Tefolle DNA waard laden op de gel. Ferminderje it bedrach fan DNA.
● Tefolle sâlt yn it DNA. Brûk ethanol-ôfslach om oerstallige sâlten yn avansearre te ferwiderjen.
● It DNA wie kontaminearre mei proteïne. Brûk fenolekstraksjes om proteïne yn avansearre te ferwiderjen.
● It DNA waard denaturearre. Net ferwaarmje foar elektroforese. Ferwiderje DNA yn buffer mei 20 mM NaCl.
2. Anomalies DNA band migraasje
● Renaturaasje fan 'e COS-side fan λHind III-fragmint. Heat DNA foar 5 minuten ûnder 65 ° C foar elektroforese, en koel it dan op iis ienheid foar 5 minuten.
● Unjildich electrophoresis betingsten waarden brûkt. Lit de spanning net mear as 20 V / cm, en behâlde in temperatuer <30 ° C tidens elektroforese. Kontrolearje dat de elektroforesebuffer genôch bufferkapasiteit hat.
● It DNA waard denaturearre. Net ferwaarmje foar elektroforese. Ferwiderje DNA yn buffer mei 20 mM NaCl.
3. Faint of gjin DNA bands op agarose gel
● Der wie net genôch kwantiteit of konsintraasje fan DNA op 'e gel laden. Fergrutsje it bedrach fan DNA. Polyacrylamide gel electrophoresis is wat gefoeliger as agarose electrophoresis, en sample lading kin wurde fermindere passend.
● It DNA waard degradearre. Foarkom nuklease fersmoarging.
● It DNA waard electrophoresed út de gel. Electrophorese de gel foar minder tiid, brûk in legere spanning, of brûk in heger persintaazje gel.
● Unjildich W ljocht boarne waard brûkt foar fisualisaasje fan ethidium bromide-bevlekte DNA. Brûk in koarte golflingte (254 nm) W ljocht foar gruttere gefoelichheid.
4. DNA bands mist
●De lytse grutte DNA waard electrophoresed út de gel. Electrophorese de gel foar minder tiid, brûk in legere spanning, of brûk in heger persintaazje gel.
● Moeilik om de DNA-banden fan ferlykbere molekulêre te ûnderskieden. Ferheegje de elektroforesetiid, en kontrolearje de konsintraasjefan 'e gel om te soargjen dat it korrekte persintaazje gel wurdt brûkt.
● It DNA waard denaturearre. Net ferwaarmje foar elektroforese. Ferwiderje DNA yn buffer mei 20 mM NaCl.
● De DNA-strings binne enoarm, en konvinsjonele gelelektroforese is net geskikt. Analysearje op pulsgelelektroforese.Hokker oare problemen hawwe jo hân mei agarosegelelektroforese? Wy sille mear ûndersykje foar gidsen yn 'e takomst.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) is in spesjalisearre bedriuw dat him rjochtet op elektroforese-relatearre produkten yn Sina. It ferhaal begjint yn 1970 doe't Sina de herfoarming en iepeningstiid noch net yngien hie. Troch jierren 'ûntwikkeling hat Liuyi Bitotech in eigen merk, dat stiet bekend as de Liuyi Brand yn' e ynlânske merk foar elektroforeseprodukten.
It merk Liuyi hat mear dan 50 jier skiednis yn Sina en it bedriuw kin oer de heule wrâld stabile en heechweardige produkten leverje. Troch jierrenlange ûntwikkeling is it jo kar wurdich!
De horizontale electrophoresis sellen (tanks / keamers) fan Liuyi Biotech binne hege kwaliteit mei goede uterlik. Mei ferskillende maten fan gel trays, se kinne foldwaan oan jo ferskillende eksperimintele easken. Wy hawwe ús eigen technyske team en fabryk. Fan ûntwerp oant fabrikaazje, de grûnstoffen oant de wichtige dielen, kinne wy it hiele proses kontrolearje. De DYCP 31-searje is foar DNA-elektroforese, dy't model binneDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, enDYCP-31E. De ferskillen ûnder harren binne gel maten en priis. Wy leverje produkten yn folsleine maten foar ús klanten. It modelDYCP-32Ckin meitsje de grutste gel 250mm * 250mm.
Underwilens riede wy ús elektroforese-voeding oanDYY-6C,DYY-6DenDYY-10Cfoar ús electrophoresis sellen (tanks / keamers) DYCP-31 en 32 rige.
As jo wolle mear ynformaasje oer de produkten, Besykje asjebleaft dizze webside foar in fa mear, en wolkom om kontakt mei ús op fia e-mail foar in lit ús witte wat jo wolle, en sjen oft wy kinne biede de oplossings foar dy.
Foar mear ynformaasje oer ús, nim dan kontakt mei ús op fia e-post[e-post beskerme], [e-post beskerme].
Post tiid: mei-09-2022