Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) is in gefoelige en rappe technyk dy't benammen brûkt wurdt om DNA-skea en reparaasje yn yndividuele sellen te detektearjen. De namme "Comet Assay" komt fan 'e karakteristike komeet-achtige foarm dy't yn 'e resultaten ferskynt: de kearn fan 'e sel foarmet de "kop", wylst de skansearre DNA-fragminten migrearje, wêrtroch in "sturt" ûntstiet dy't liket op in komeet.
Prinsipe
It prinsipe fan 'e Comet Assay is basearre op' e migraasje fan DNA-fragminten yn in elektrysk fjild. Yntakt DNA bliuwt binnen de selkearn, wylst skansearre of fragmintearre DNA nei de anode migreart, en foarmje de "sturt" fan 'e komeet. De lingte en yntinsiteit fan 'e sturt binne direkt evenredich mei de omfang fan DNA-skea.
Proseduere
- Sel tarieding: Sellen dy't wurde hifke wurde mingd mei lege-smeltpunt agarose en ferspraat op mikroskoop dia 's te foarmjen in unifoarm laach.
- Cell Lysis: De dia's wurde ûnderdompele yn in lysis-oplossing om it selmembraan en kearnmembraan te ferwiderjen, wêrtroch it DNA bleatsteld.
- Elektroforese: De dia's wurde pleatst yn in elektroforese keamer ûnder alkaline of neutrale omstannichheden. Beskeadige DNA-fragminten migrearje nei de positive elektrode ûnder ynfloed fan it elektryske fjild.
- Staining: Nei elektroforese wurde de dia's kleurd mei in fluorescent kleurstof (bygelyks ethidiumbromide) om it DNA te visualisearjen.
- Mikroskopyske analyze: Mei in fluoreszensmikroskoop of spesjale software wurde de komeetfoarmen analysearre, en parameters lykas sturtlingte en yntinsiteit wurde metten.
Ofbylding fan biorender
Data Analysis
Resultaten fan 'e Comet Assay wurde evaluearre op basis fan ferskate wichtige parameters:
- Tail Length: Fertsjintwurdet de ôfstân dy't it DNA migreart, wat de omfang fan DNA-skea oanjout.
- Tail DNA ynhâld: It persintaazje DNA dat migreart yn 'e sturt, faak brûkt as kwantitative mjitte fan DNA-skea.
- Olive Tail Moment (OTM): Kombinearret sawol sturt lingte en sturt DNA ynhâld foar in foarsjen in mear wiidweidige mjitte fan DNA skea.
Applikaasjes
- Genotoxicity Studies: De Comet Assay wurdt in protte brûkt om de effekten fan gemikaliën, drugs en strieling op sel DNA te beoardieljen, wêrtroch it in wichtich ark is foar testen fan genotoxiciteit.
- Miljeu Toxicology: It helpt by it analysearjen fan de ynfloed fan miljeu-fersmoarging op it DNA fan organismen, en jout ynsjoch yn ekosysteemfeiligens.
- Medysk en klinysk ûndersyk: De Comet Assay wurdt brûkt by it bestudearjen fan DNA-reparaasjemeganismen, kanker en oare DNA-relatearre sykten. It evaluearret ek de ynfloed fan kankerterapyen lykas radioterapy en gemoterapy op DNA.
- Food and Agriculture Sciences: Wurdt brûkt om de feiligens fan pestiziden, fiedingsadditieven en oare stoffen te beoardieljen, en om har giftige effekten te studearjen yn diermodellen.
Foardielen
- Hege gefoelichheid: Yn steat om lege nivo's fan DNA-skea te detektearjen.
- Ienfâldige operaasje: De technyk is ienfâldich, wêrtroch't it geskikt is foar screening mei hege trochslach.
- Wide applikaasje: It kin tapast wurde op ferskate sel soarten, ynklusyf bist en plant sellen.
- Quantification Challenges: Wylst it jaan fan kwalitative gegevens oer DNA skea, fertrout kwantitative analyze swier op software en ôfbylding analyze techniken.
- Eksperimintele Betingsten: Resultaten kinne wurde beynfloede troch faktoaren lykas elektroforesetiid en pH, dy't soarchfâldige kontrôle fan eksperimintele omstannichheden fereaskje.
Beheinings
De Comet Assay is in ûnskatbere wearde ark yn biomedysk ûndersyk, miljeuwittenskip en medisynûntwikkeling fanwegen syn fleksibiliteit en hege gefoelichheid by it opspoaren fan DNA-skea en reparaasje. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)biedt horizontale elektroforese keamer foar komeet assay. Wolkom om kontakt mei ús te besprekken oer deKomeet Assayprotokol.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) hat mear as 50 jier spesjalisearre yn it meitsjen fan elektroforese-ynstruminten mei ús eigen profesjonele technyske team en R&D-sintrum. Wy hawwe betroubere en folsleine produksjeline fan ûntwerp oant ynspeksje, en pakhús, lykas marketingstipe. Us haadprodukten binne Electrophoresis Cell (tank / keamer), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System ensfh.
As jo in oankeapplan hawwe foar ús produkten, aarzel dan net om kontakt mei ús op te nimmen. Jo kinne ús berjocht stjoere op e-post[e-post beskerme]of[e-post beskerme], of skilje ús asjebleaft op +86 15810650221 of foegje Whatsapp +86 15810650221 ta, of Wechat: 15810650221.
Scan asjebleaft de QR-koade om ta te foegjen oan Whatsapp of WeChat.
Post tiid: Sep-20-2024