Basistechniken fan elektroforese fan agarosegel (2)

Sample Tarieding enLoading

Troch it gebrûk fan in trochgeande buffersysteem sûnder stapeljen fan gel yn 'e measte gefallen moatte de samples in passende konsintraasje en in lyts folume hawwe. Brûk apipetteom it probleem stadichoan ta te foegjen, mei 5-10 μg per put, om in signifikante fermindering fan resolúsje te foarkommen. Wannearladen sample, de stroomfoarsjenning moat wurde útskeakele. It stekproef moat in yndikatorferve (0,025% bromophenol blau of oranje) en sukrose (10-15%) of glycerol (5-10%) befetsje om syn tichtheid te ferheegjen, it probleem te konsintrearjen en diffusion te foarkommen. Soms kinne sukrose of glycerol lykwols U-foarmige bands feroarsaakje yn elektroforeseresultaten, dy't kinne wurde foarkommen troch 2,5% Ficoll (polyvinylpyrrolidon) te brûken.

1

Elektroforese

De spanning foar elektroforese is 5-15 V / cm, oer it generaal om 10 V / cm. Foar de skieding fan grutte molekulen moat de spanning leger wêze, meastentiids net mear as 5 V / cm.

2

Staining

Fluorescent kleurstof ethidiumbromide (EB) wurdt faak brûkt foar kleurjen om DNA-banden yn agarosegel te observearjen. EB kin ynfoegje tusken basispearen fan DNA-molekulen, wêrtroch EB mei DNA bineart. De absorption fan 260 nm ultraviolet ljocht troch DNA wurdt oerdroegen oan EB, en de bûne EB emittearret fluoreszinsje by 590 nm yn 'e read-oranje regio fan it sichtbere ljochtspektrum. It kleurjen fan de gel yn in 1 mmol / L MgSO4-oplossing foar 1 oere kin eftergrûnfluoreszens ferminderje feroarsake troch unbound EB, en fasilitearret de deteksje fan lytse hoemannichten DNA.

EB-ferve hat ferskate foardielen: it is maklik te brûken, brekt gjin nukleïnesoeren, hat hege gefoelichheid en kin sawol DNA as RNA kleurje. EB kin op elk momint wurde tafoege oan it stekproef en folge mei UV-absorption. Nei it kleurjen kin EB fuortsmiten wurde troch ekstraksje mei n-butanol.

EB-ferve is lykwols in krêftige mutagen, en foarsoarchsmaatregels, lykas it dragen fan polyetyleenhandschoenen, moatte wurde nommen by it behanneljen. Acridine-oranje is ek in faak brûkte kleurstof, om't it kin ûnderskiede tusken single-stranded en double-stranded nucleic soeren (DNA, RNA). It toant griene fluoreszinsje (530 nm) foar dûbele strâne nukleïnesoeren en reade fluoreszinsje (640 nm) foar ienstrengige nukleïnesoeren. Derneist kinne oare kleurstoffen lykas methyleneblau, methylenegrien en kinoline B brûkt wurde foar kleurjen.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) hat mear as 50 jier spesjalisearre yn it meitsjen fan elektroforese-ynstruminten mei ús eigen profesjonele technyske team en R&D-sintrum. Wy hawwe betroubere en folsleine produksjeline fan ûntwerp oant ynspeksje, en pakhús, lykas marketingstipe. Us haadprodukten binne Electrophoresis Cell (tank / keamer), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System ensfh.

3

Wy binne no op syk nei partners, sawol OEM elektroforese tank as distributeurs wurde wolkom hjitten.

As jo ​​​​in oankeapplan hawwe foar ús produkten, aarzel dan net om kontakt mei ús op te nimmen. Jo kinne ús berjocht stjoere op e-post[e-post beskerme]of[e-post beskerme], of skilje ús asjebleaft op +86 15810650221 of foegje Whatsapp +86 15810650221 ta, of Wechat: 15810650221.

Scan asjebleaft de QR-koade om ta te foegjen oan Whatsapp of WeChat.

2


Post tiid: Dec-20-2023