Basistechniken fan elektroforese fan agarosegel (1)

1. Klassifikaasje

Gelelektroforese is ferdield yn fertikale typen (ynklusyf kolomgels en slabgels) en horizontale typen (benammen slabgels) (figuer 6-18). Algemien, fertikale skieding is wat superieur oan horizontale, mar horizontale gel tarieding hat op syn minst fjouwer foardielen: der is stipe ûnder de hiele gel, wêrtroch it brûken fan lege-konsintraasje agarose; it is mooglik om agarose-gelplaten fan ferskate spesifikaasjes te meitsjen; gel tarieding en sample laden binne handiger; de electrophoresis keamer is maklik te bouwen en kosten-effektyf. Sûnt horizontale elektroforese wurdt útfierd mei de agarosegelplaat folslein ûnderdompele oer 1 mm ûnder it oerflak fan 'e elektroforesebuffer, wurdt it ek wol ûnderdompele elektroforese neamd.

图片2

Electrophoresis Tank DYCP-31DN foar agarose gel elektroforese

2. Buffer System

By skieding fan nukleïnesoeren nimme de measte systemen kontinue systemen oan. Faak brûkte elektroforesebuffers omfetsje TBE (0,08mol/L Tris·HCl, pH 8,5, 0,08mol/L boorsäure, 0,0024mol/L EDTA) buffer en THE (0,04mol/L Tris·HCl, pH 7,8, 0,02mol/L natriumacetat, 0,0018 mol/l EDTA) buffer. Dizze buffers wurde oer it generaal taret as 10x stock-oplossingen en verdund oant de fereaske konsintraasje as yn gebrûk. De migraasjeraten fan lineêre en sirkulêre DNA yn agarosegel fariearje mei de brûkte buffer. Yn DE buffer is de migraasjesnelheid fan lineêr DNA grutter dan dy fan sirkulêr DNA, wylst yn TBE-buffer it tsjinoerstelde is.

3

3.Tarieding fan Agarose Gel

(1) Tarieding fan Horizontale Agarose Gel

(a) Bereid de fereaske konsintraasje fan agarosegel mei 1x elektroforesebuffer.

(b) Heakje de agarose om folslein te ûntbinen yn in siedende wetterbad, op in magnetyske roerder, of yn in mikrofoave. Koel de agarose-oplossing nei 55 ° C en foegje ethidiumbromide (EB) kleurstof ta in definitive konsintraasje fan 0,5 μg / ml.

(c) Seal de rânen fan glês of acryl platen mei in lyts bedrach fan agarose gel, foegjen in kam, en pleats de kam tosken oer 0,5 ~ 1,0 mm boppe de plaat.

(d) Giet de gesmolten agarosegel-oplossing kontinu yn 'e glêzen of acrylplaatfoarm (de dikte hinget ôf fan it folume fan it DNA-monster), en foarkommen fan de ynfiering fan luchtbellen. Lit it natuerlik fêstigje by keamertemperatuer.

(e) Foarsichtich fuortsmite de kam nei folsleine solidification. Foegje in passende hoemannichte elektroforesebuffer ta oan 'e geltank, soargje derfoar dat de gelplaat sa'n 1 mm ûnder it oerflak fan 'e elektroforesebuffer wurdt ûnderdompele.

(2) Tarieding fan fertikale Agarose Gel

(a) Fuortsmite grease of residu út glêzen platen troch waskjen mei ethanol.

(b) Plak spacer platen tusken foar- en efterkant dammen, align de rânen fan de spacer platen mei de foar- en efterkant dammen, en befeiligje se mei clamps.

(c) Add 2% agarose yn 1x buffer tusken de rânen fan de spacer platen te foarmjen in 1 sm hege agarose plug oan de ûnderkant fan de gel casting keamer.

(d) Giet de gesmolten agarosegel by de winske konsintraasje, taret yn 1x buffer, yn 'e gelkeamer oant 1 sm ûnder de top.

(e) Foegje de kam yn, foar te kommen dat loftbellen ûnder de kamtosken falle. Soms kinne rimpels ferskine op 'e kamtosken by it koeljen fan agarosegel; yn sokke gefallen, foegje gewoan wat gesmolten agarose oan 'e boppekant ta om it te fersterkjen.

(f) Fuortsmite de kam. Om foar te kommen buffer leakage yn it laden slot, seal de ferbining tusken de agarose gel plaat en de electrophoresis keamer mei 2% agarose en heakje it fereaske bedrach fan buffer.

(g) Foegje 1x elektroforesebuffer ta oan 'e gelkeamer.

(h) Laad DNA-monsters foarsichtich op 'e agarosegel ûnder de buffer.

3

Mear ynformaasje oer de basiskennis oer agarosegelelektroforese, sille wy nije wike diele. Wolle jo dat dizze ynformaasje nuttich is foar jo eksperimint.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) hat mear as 50 jier spesjalisearre yn it meitsjen fan elektroforese-ynstruminten mei ús eigen profesjonele technyske team en R&D-sintrum. Wy hawwe betroubere en folsleine produksjeline fan ûntwerp oant ynspeksje, en pakhús, lykas marketingstipe. Us haadprodukten binne Electrophoresis Cell (tank / keamer), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System ensfh.

Wy binne no op syk nei partners, sawol OEM elektroforese tank as distributeurs wurde wolkom hjitten.

As jo ​​​​in oankeapplan hawwe foar ús produkten, aarzel dan net om kontakt mei ús op te nimmen. Jo kinne ús berjocht stjoere op e-post[e-post beskerme]of[e-post beskerme], of skilje ús asjebleaft op +86 15810650221 of foegje Whatsapp +86 15810650221 ta, of Wechat: 15810650221.

Scan asjebleaft de QR-koade om ta te foegjen oan Whatsapp of WeChat.

2


Post tiid: Dec-07-2023